Bestemmelse av oksalsyreinnhold i frukt og grønnsaker ved hjelp av høytrykksvæskekromatografi (HPLC)
1. Eksperimentelt prinsipp og metodedesign
Som en vanlig organisk syre i frukt og grønnsaker, påvirker oksalsyreinnholdet direkte smaken og næringsverdien til mat. Dette eksperimentet bruker reversfase høytrykksvæskekromatografi (RP-HPLC). Under sure mobile faseforhold separeres oksalsyre fra interfererende stoffer ved hjelp av en C18 kromatografisk kolonne. En ultrafiolett detektor innstilt på 210 nm brukes til kvantitativ analyse, basert på UV-absorpsjonsegenskapene til karboksylgruppene i oksalsyremolekyler.
2. Standardkurve og prøveforberedelse
En gradientfortynningsmetode brukes til å fremstille standardløsninger: vei nøyaktig 25,0 mg oksalsyredihydrat og fortynn til 25 ml med ultrarent vann for å oppnå en stamløsning på 1 mg/ml. Denne fortynnes sekvensielt i en serie standardløsninger på 50, 100, 200, 400 og 800 µg/ml, med hver konsentrasjon injisert i tre eksemplarer.
For prøvepreparering brukes mikrobølgeassistert ekstraksjon: vei 5,00 g frukt-/grønnsakshomogenat, tilsett 10 ml 0,1 mol/L saltsyreløsning, behandle ved 60 °C med mikrobølgeovn i 10 minutter, filtrer gjennom et 0,45 µm membranfilter og samle filtratet for testing.
3. Optimalisering av kromatografiske forhold
Den mobile fasen er et 0,01 mol/L kaliumdihydrogenfosfatbuffer (pH 2,5)-acetonitril (95:5)-system, med en strømningshastighet på 0,8 ml/min og en kolonnetemperatur på 35 °C. Justering av acetonitril-forholdet viser at når den organiske fasen overstiger 10 %, forkortes retensjonstiden for oksalsyre til mindre enn 3 minutter, men det oppstår en maksimal haleavsetning. Under de endelige optimaliserte forholdene er retensjonstiden for oksalsyre 4,2 minutter, noe som oppnår fullstendig separasjon fra tilstøtende sitronsyre og eplesyre (oppløsning > 1,5).
4. Metodevalidering
Verifisering av lineært område viser et godt lineært forhold mellom toppareal og konsentrasjon i området 10–1000 µg/ml (R² = 0,9993). Deteksjonsgrensen (LOD), bestemt ved hjelp av signal-til-støy-forholdsmetoden, er 0,5 µg/ml. I repeterbarhetstester er RSD for seks replikatbestemmelser av den samme spinatprøven 1,8 %. Eksperimenter med toppgjenvinning på tre nivåer (80 %, 100 % og 120 %) gir gjennomsnittlig gjenvinning på henholdsvis 98,2 %, 102,4 % og 97,8 %, som oppfyller kravene for kvantitativ analyse.
5. Analyse av ekte prøver
Seks kommersielt tilgjengelige frukter og grønnsaker ble testet: spinat (356 ± 12 mg/100 g), selleri (215 ± 9 mg/100 g), tomat (18 ± 2 mg/100 g), eple (6 ± 1 mg/100 g), banan (ikke påvist) og brokkoli (89 ± 5 mg/100 g). En sammenligning med den nasjonale standardmetoden (GB 5009.277-2016) viser at det relative avviket mellom de to metodene er mindre enn 5 %, noe som bekrefter påliteligheten til denne metoden. Spesielt viser HPLC-metoden høyere følsomhet enn tradisjonelle titreringsmetoder ved analyse av prøver med lavt innhold.
6. Hovednotater
Kontroller pH-verdien nøye under forbehandling av prøven. Hvis ekstraktets pH overstiger 3, vil kalsiumoksalatutfelling føre til lave testresultater. Den mobile fasen bør tilberedes fersk daglig for å unngå saltutfelling og blokkering av kolonnen. Etter hver 20. injeksjon, skyll kolonnen med acetonitril-vann (30:70) i 30 minutter for å forhindre forringelse av kolonneeffektiviteten. For pigmentholdige prøver (f.eks. purpurkål) anbefales det å legge til et fastfaseekstraksjonsrensetrinn før injeksjon.
7. Bruks- og utvidelsesveiledning
Denne metoden kan utvides til å detektere oksalsyre i biologiske prøver som urin og blod. Ved å justere den mobile fasesammensetningen (f.eks. ved å tilsette tetrabutylammoniumhydroksid) kan oksalsyre og dens metabolitter bestemmes samtidig. Kombinert med en massespektrometridetektor kan en mer presis spordeteksjonsmetode etableres. I næringsmiddelindustrien kan denne metoden gi viktig datastøtte for valg av varianter med lavt oksalsyreinnhold og optimalisering av kokeprosesser.
Zibo Anhao Chemical Co., Ltd. – Oksalsyre
Zibo Anhao Chemical Co., Ltd. er en pålitelig leverandør og eksportør av oksalsyre av høy kvalitet (industriell kvalitet, 99,6 % min.) fra Shandong i Kina. Oksalsyren vår er et hvitt krystallinsk fast stoff, også kjent som etandisyre, med molekylformelen C₂H₂O₄. Den har høy renhet, lave urenheter og stabil kvalitet på tvers av batcher, og oppfyller kravene til tekstil-, lær-, metallurgi-, sjeldne jordartsmetallforedlings-, kjemisk rengjørings- og byggebransjen.
Vi leverer både vannfri og dihydrat oksalsyre, tilgjengelig i 25 kg sekker, 50 kg sekker og 1000 kg bulksekker. Med strenge kvalitetskontrollprosedyrer, komplette testrapporter og fleksible leveringsplaner sikrer vi stabil levering og konsistent ytelse for globale kjøpere. Produktene våre har blitt eksportert mye til Sørøst-Asia, Europa, Afrika og Amerika, og har fått anerkjennelse for pålitelig kvalitet og konkurransedyktige priser.
Velg Zibo Anhao Chemical for pålitelig oksalsyreforsyning og profesjonell kjemikalieservice på ett sted.
Velg Zibo Anhao Chemical for oksalsyre med høy renhet som gir stabil ytelse og verdi for bedriften din. Kontakt oss for bulkbestillinger eller tekniske spesifikasjoner: info@anhaochemical.com
